xilazina
C12H16N2S 220,34
4H-1,3-Tiazina-2-amina, N-(2,6-dimetilfenil)-5,6-dihidro-.
5,6-Dihidro-2-(2,6-xilidina)-4H-1,3-tiazina [7361-61-7].
» La xilazina contiene no menos del 98,0 por ciento y no más del 102,0 por ciento de C12H16N2S.
Embalaje y almacenamiento- Conservar en recipientes herméticos. Tienda a las 25, se permiten excursiones entre las 15 y las 30.
Etiquetado- Cuando esté destinado únicamente a uso veterinario, así lo indica la etiqueta.
Estándares de referencia USP<11>
ER Xilazina USP
Identificación-
R: Absorción de infrarrojos <197K>.
B: Absorción ultravioleta<197U>-
Solución: 5 µg por ml.
Medio: ácido clorhídrico 0,1 N.
C: Prueba de identificación cromatográfica en capa fina<201>-
Solución de prueba: 2 mg por ml, en cloroformo.
Sistema de disolvente de revelado: acetona, cloroformo y metanol (2:1:1).
Procedimiento- Antes de las aplicaciones de la Solución de prueba y la Solución estándar, secar la placa a 105ºC durante no menos de 30 minutos y dejarla enfriar en un desecador. Dejar secar las aplicaciones con ayuda de una corriente de aire caliente y desarrollar. Examine bajo luz UV de longitud de onda corta: el tamaño, la intensidad y el valor de RF del punto principal obtenido de la Solución de prueba corresponden a los del punto principal obtenido de la Solución estándar.
Rango de fusión<741>: entre 136 y 142.
Pérdida por secado<731>- Secar al vacío a 60ºC durante 4 horas: no pierde más del 0,5% de su peso.
Residuo por ignición<281>: no más del 0,1%.
Metales pesados, Método II<231>: 20 µg por g.
Límite de 3-amino-1-propanol- Prepare una solución de prueba de xilazina en metanol que contenga 100 mg por ml, utilizando sonicación para lograr la disolución. Preparar una Solución estándar de 3-amino-1-propanol en metanol que contenga 0,5 mg por ml. Aplique por separado 5 µL de la solución de prueba y la Solución estándar a una placa cromatográfica en capa fina (ver Cromatografía<621>) recubierta con una capa de 0,25 mm de gel de sílice cromatográfico. Dejar secar las aplicaciones y desarrollar los cromatogramas en una cámara cromatográfica saturada, que contenga un sistema solvente consistente en una mezcla de alcohol e hidróxido de amonio (80:20) hasta que el frente del solvente se haya movido aproximadamente tres cuartos de la longitud de la placa. Retire la placa de la cámara cromatográfica, marque el frente del disolvente y seque la placa al aire. Rocíe la placa con una solución alcohólica de ninhidrina (1 en 500) e inmediatamente caliente la placa en un horno a 105. Cuando las manchas sean visibles, retire la placa del horno y déjela enfriar. Examinar los cromatogramas y comparar las intensidades de las manchas correspondientes al 3-amino-1-propanol: la intensidad de la mancha para el 3-amino-1-propanol obtenida de la solución problema no es mayor que la de la mancha para el 3-amino-1-propanol obtenida de la Solución estándar (0,5%).
Límite de acetona y alcohol isopropílico-
Diluyente- Diluir 15 ml de ácido acético glacial con agua hasta 1000 ml y mezclar.
Solución estándar- Transfiera 10,0 µL de acetona y alcohol isopropílico a un matraz volumétrico de 500 ml, diluya a volumen con diluyente y mezcle. Esta solución contiene 15,8 µg de acetona por ml y 15,7 µg de alcohol isopropílico por ml.
Solución de prueba- Transfiera aproximadamente 100 mg de xilazina, pesados ​​con precisión, a un matraz aforado de 10 ml, disuélvalos y diluya a volumen con diluyente y mezcle.
Sistema cromatográfico (ver Cromatografía<621>)- El cromatógrafo de gases está equipado con un detector de ionización de llama y una columna de 2-mm × 1,8-m rellena con 0,1% de fase G25 en 80- a 100-soporte de malla S7. Se utiliza helio como gas portador con un caudal de aproximadamente 30 ml por minuto. Las temperaturas del puerto de inyección y del detector se mantienen en aproximadamente 240 y 275ºC, respectivamente. El sistema se programa según los siguientes pasos. La temperatura de la columna se mantiene a 30ºC durante 6 minutos después de cada inyección, luego se aumenta a 100ºC a una velocidad de 10ºC por minuto, luego se aumenta aún más hasta 220ºC a una velocidad de 15ºC por minuto y se mantiene durante 10 minutos. Cromatografía la solución estándar y registra las respuestas de los picos como se indica en el Procedimiento: los tiempos de retención relativos son aproximadamente 0,75 para acetona y 1,0 para alcohol isopropílico; la resolución, R, entre acetona y alcohol isopropílico no es inferior a 2,0; el factor de cola determinado a partir de cada pico de analito no es superior a 2,0; y la desviación estándar relativa para inyecciones repetidas no es superior al 2,0%.
Procedimiento- Inyecte por separado volúmenes iguales (aproximadamente 2 µL) de la Solución estándar y la Solución de prueba en el cromatógrafo, registre los cromatogramas y mida las áreas de los picos principales. Calcule los porcentajes de acetona y alcohol isopropílico en la porción de xilazina tomada por la fórmula:
(C/W)(rU/rS)
en la que C es la concentración, en µg por ml, de acetona o alcohol isopropílico en cada ml de Solución estándar; W es el peso, en mg, de xilazina tomada para preparar la solución de prueba; y rU y rS son las respuestas para el pico de analito relevante obtenido de la Solución de prueba y la Solución estándar, respectivamente: no se encuentran más del 0,02% de acetona y no más del 0,2% de alcohol isopropílico.
Pureza cromatográfica-
Solución A, Solución B, Fase móvil y Diluyente- Proceda como se indica en el Ensayo.
Solución estándar- Diluir cuantitativamente un volumen medido con precisión de la Preparación estándar preparada en el Ensayo con Diluyente para obtener una solución que tenga una concentración de 0,008 mg de ER Xilazina USP por ml.
Solución de prueba- Transfiera aproximadamente 100 mg de xilazina, pesados ​​con precisión, a un matraz volumétrico de 10 ml, agregue 5,0 ml de solución B y agite para disolver. Agregue aproximadamente 4 ml de solución A y revuelva. Diluir a volumen con la Solución A y mezclar.
Sistema cromatográfico (ver Cromatografía<621>)- El cromatógrafo líquido está equipado con un detector de 205 nm y una columna de 4,6 mm × 25 cm que contiene el relleno L7 y una guardacolumna. El caudal es de aproximadamente 1 ml por minuto. Equilibrar la columna con una fase móvil que consiste en 75% de Solución A y 25% de Solución B. Mantener esta composición durante 8 minutos después de cada inyección, después de lo cual la proporción de Solución B se incrementa linealmente del 25% al ​​70% durante un período de 27 minutos, y se mantiene en esa composición durante 5 minutos; luego aumente rápidamente la proporción de Solución A al 75% antes de la siguiente inyección. Cromatografía la Solución estándar y registra las respuestas de los picos según se indica en el Procedimiento: el factor de cola no es superior a 1,5; y la desviación estándar relativa para inyecciones repetidas no es superior al 5,0%.
Procedimiento- Inyecte por separado volúmenes iguales (aproximadamente 10 µL) de la Solución estándar y la Solución de prueba en el cromatógrafo, registre los cromatogramas y mida las áreas de los picos principales. Calcule el porcentaje de cada impureza en la xilacina tomada mediante la fórmula:
1000(C/W)(ri F/rS)
en la que C es la concentración, en mg por ml, de ER Xilazina USP en la Solución estándar; W es el peso, en mg, de xilazina tomada para preparar la solución de prueba; ri es la respuesta de cualquier pico de impureza individual en el cromatograma de la Solución de prueba que no está presente en el cromatograma del Diluyente; F es el factor de respuesta de 0,72 para el pico de 2,6-dimetilanilina en un tiempo de respuesta de aproximadamente 0,8 con respecto al tiempo de retención de xilazina, de 0,36 para una impureza con un tiempo de retención relativo de aproximadamente 1,3, 0,37 para isotiocianato de 2,6-dimetilfenilo con un tiempo de retención relativo de aproximadamente 2, y 1,0 para cualquier otra impureza; y rS es la respuesta del pico de xilazina en el cromatograma de la Solución estándar: no se encuentra más del 0,5% de cualquier impureza individual; y la suma de todas las impurezas encontradas no supera el 1%.
Ensayo-
Solución A- Disolver 3,03 g de 1-heptanosulfonato de sodio en 800 ml de agua, ajustar con ácido sulfúrico 2 N a un pH de 3,0, diluir con agua hasta 1000 ml y mezclar. Pasar a través de un filtro que tenga una porosidad de 0,5 -μm o más fina.
Solución B- Utilice acetonitrilo.
Fase móvil- Utilice mezclas variables de Solución A y Solución B según las indicaciones del sistema cromatográfico.
Diluyente- Prepare una mezcla de Solución A y Solución B (50:50).
Preparación estándar- Prepare una solución de ER Xilazina USP en Diluyente que tenga una concentración conocida de aproximadamente 0,4 mg por ml.
Preparación del ensayo- Transfiera aproximadamente 10 mg de xilazina, pesados ​​con precisión, a un matraz volumétrico de 25 ml, diluya a volumen con diluyente y mezcle.
Sistema cromatográfico (ver Cromatografía<621>)- El cromatógrafo líquido está equipado con un detector de 226 nm y una columna de 3,9 mm × 30 cm que contiene el relleno L1. El caudal es de aproximadamente 1 ml por minuto. Equilibrar la columna con una fase móvil que consiste en 70% de Solución A y 30% de Solución B. Mantener esta composición durante 5 minutos después de cada inyección, después de lo cual la proporción de Solución B se incrementa linealmente de 30% a 40% durante un período de 5 minutos, y se mantiene en esa composición durante 5 minutos; luego aumente rápidamente la proporción de Solución A al 70% antes de la siguiente inyección. Cromatografía la preparación estándar y registra las respuestas de los picos como se indica en el Procedimiento: el factor de cola no es superior a 2,0; y la desviación estándar relativa para inyecciones repetidas no es superior al 2,0%.
Procedimiento- Inyecte por separado volúmenes iguales (aproximadamente 10 µL) de la preparación estándar y de la preparación de ensayo en el cromatógrafo, registre los cromatogramas y mida las áreas de los picos principales. Calcular la cantidad, en mg, de C12H16N2S en la porción de Xilazina tomada por la fórmula:
25C(rU/rS)
en la que C es la concentración, en mg por ml, de ER Xilazina USP en la Preparación estándar; y rU y rS son las respuestas del pico de xilazina obtenidas de la Preparación de ensayo y la Preparación estándar, respectivamente.