DEFINICIÓN
El succinato de polietilenglicol de vitamina E es una mezcla formada por la esterificación del succinato de ácido d-alfa tocoferilo y polietilenglicol. La mezcla de ésteres consiste principalmente en polietilenglicol monoesterificado y una pequeña cantidad de polietilenglicol diesterificado. Contiene no menos de 25,0% de d-alfa tocoferol (C29H50O2).
IDENTIFICACIÓN
• A. Prueba de identificación cromatográfica de gases
Análisis: Proceder como se indica en la prueba de Contenido de Alfa Tocoferol.
Criterios de aceptación: El tiempo de retención del pico mayor de la Solución muestra corresponde al de la Solución estándar.
COMPOSICIÓN
• Contenido de Alfa Tocoferol
Disolvente: 0,25 ml de fenolftaleína SR en 1 litro de alcohol
Solución de estándar interno: 12 mg/mL de araquidato de etilo en isooctano
Solución estándar: Transferir 32,5 mg de ER Alfa Tocoferol USP a un matraz de reacción adecuado. Añadir 2 ml de piridina y 0,5 ml de N,O-bis(trimetilsilil)trifluoroacetamida con trimetilclorosilano al 1% y calentar el matraz a 100ºC durante 10 min. Enfriar el matraz, agregar 5,0 ml de solución de estándar interno seguido de 20 ml de isooctano y agitar.
Solución muestra: Transferir una cantidad equivalente a 0,100–0,160 g de succinato de polietilenglicol de vitamina E fundido a 60ºC a un tubo de cultivo (de aproximadamente 20 cm de largo y 2,5 cm de diámetro) equipado con un tapón de rosca. Agregue de 40 a 50 mg de ácido ascórbico y unas cuantas virutas hirviendo, seguido de 20 ml de disolvente. [Nota-Refluya la solución suavemente sin que se emita el contenido.] Coloque el tubo en un bloque calefactor ajustado a 100-150. Cuando la muestra esté completamente disuelta, agregar 0,25 g de hidróxido de potasio y continuar a reflujo durante 30 min. Retire el tubo del fuego y, mientras el contenido aún esté caliente, agregue 1 a 2 ml de ácido clorhídrico gota a gota hasta que desaparezca la coloración rosada. [Precaución-Reacción exotérmica. Deje que el ácido gotee por el interior del tubo para evitar salpicaduras.] Enfríe el tubo y luego lave los lados del tubo con 20 ml de agua. Agregue 5,0 ml de solución de estándar interno, tape y agite para asegurar una mezcla completa. Deje reposar el tubo hasta que se formen dos capas distintas. Transfiera 2,5 a 3,5 ml de la capa superior a un matraz de reacción adecuado y agregue 2,0 ml de piridina seguido de 2,5 ml de N,O-bis(trimetilsilil)trifluoroacetamida con trimetilclorosilano al 1%. Calentar el matraz a 100ºC durante 10 min. Enfriar y luego agregar 12 ml de isooctano.
sistema cromatográfico
(Ver Cromatografía 621, Idoneidad del sistema).
Modo: GC
Detector: Ionización de llama
Columna: capilar de sílice fundida de 0,25-mm × 15-m; recubierto con una película de 0,25 -μm de fase G27
Temperatura
Inyector: 280
detectores: 345
Columna: Ver Tabla 1.
Tabla 1
Temperatura inicial (°) Rampa de temperatura (°/min) Temperatura final (°) Tiempo de retención a temperatura final (min)
260 20 340 1
Gas portador: helio
Caudal: 1,5 ml/min
Tamaño de la inyección: 1 µL
Tipo de inyección: relación dividida, 200:1
Idoneidad del sistema
Muestra: Solución estándar
Requisitos de idoneidad
Factor de cola: No más de 2,0 para el pico de alfa tocoferol
Desviación estándar relativa: No más de 2,0% para la relación entre el área del pico de alfa tocoferol y el área del pico del estándar interno
Análisis
Muestras: Solución estándar y Solución de muestra
Calcule el porcentaje de d-alfa tocoferol (C29H50O2) en la porción de succinato de polietilenglicol de vitamina E tomada:
Resultado = (RU/RS) × (WS/WU) × 100
RU= relación del estándar interno (área del pico de alfa tocoferol/área del pico del estándar interno) de la Solución muestra
RS= relación del estándar interno (área del pico de alfa tocoferol/área del pico del estándar interno) de la Solución estándar
WS= peso del ER Alfa Tocoferol USP utilizado para preparar la Solución estándar (mg)
WU= peso de succinato de polietilenglicol de vitamina E tomado para preparar la Solución muestra (mg)
Criterios de aceptación: No menos de 25,0%
PRUEBAS ESPECÍFICAS
• Rotación óptica, rotación específica 781S
[Nota-Esta prueba identifica el d-alfa tocoferol después de la saponificación.]
Solución muestra: Transferir 0,9 g de succinato de polietilenglicol de vitamina E, fundido a 60ºC, a un tubo de ensayo adecuado equipado con tapa y disolver en 10,0 ml de alcohol. Coloque el tubo en un bloque calefactor fijado a 100-105. [Nota-Refluya la solución suavemente sin emisión de contenido. ] Cuando la muestra esté completamente disuelta, agregue 2 a 3 gránulos de hidróxido de sodio y continúe a reflujo durante 30 minutos más. Retire el tubo del fuego y, mientras el contenido aún esté caliente, neutralícelo usando fenolftaleína como indicador agregando lentamente 10 ml de una mezcla de agua y ácido clorhídrico (1:1) hasta que desaparezca el color rosado. [Precaución-Reacción exotérmica. Deje que la solución ácida gotee por el interior del tubo para evitar salpicaduras.] Enfríe el tubo, tápelo y agítelo hasta que el contenido esté bien mezclado. Agregue 25,0 ml de heptano, tape y agite durante 1 minuto para asegurar una mezcla completa. Deje reposar el tubo hasta que se formen dos capas distintas. Transfiera la capa superior a un tubo de cultivo limpio y seco, luego agregue 10,0 ml de agua a la solución recuperada. Tape, agite y deje que las capas se separen. Transfiera la capa superior a un tubo limpio y seco. Agregue 10,0 ml de solución de ferricianuro de potasio, preparada disolviendo 2 g de ferricianuro de potasio en 10,0 ml de hidróxido de sodio 0,2 M, y vuelva a colocar la tapa. Agite vigorosamente durante 45 s y deje que las capas se separen durante 30 min. Si la capa superior de heptano está clara, continúe con la medición para una rotación específica; si no está claro, secar sobre sulfato de sodio anhidro antes de continuar con la prueba. [Nota-Utilice los resultados de la prueba de contenido de alfa tocoferol para calcular la rotación específica.]
Criterios de aceptación: No menos de +24,0
• Solubilidad en agua
Muestra: 20 g de succinato de polietilenglicol de vitamina E derretido
Análisis: Colocar la Muestra en un recipiente de vidrio sobre un agitador magnético. Agregue inmediatamente 80 ml de agua hirviendo mientras revuelve. Deje enfriar a temperatura ambiente con agitación constante.
Criterios de aceptación: La solución se aclara en 3 h.
• Valor ácido
Muestra: 1 g de succinato de polietilenglicol de vitamina E
Análisis: Disolver la Muestra en 25 mL de una mezcla de alcohol y éter (1:1) que haya sido neutralizada a fenolftaleína con hidróxido de sodio 0,1 N. Agregar 0,5 ml de fenolftaleína SR y valorar con hidróxido de sodio 0,10 N hasta que la solución permanezca ligeramente rosada después de agitar durante 30 s.
Criterios de aceptación: No más de 0,027 mEq/g, equivalente a no más de 0,27 ml de hidróxido de sodio 0,10 N.
REQUISITOS ADICIONALES
• Envasado y Almacenamiento: Conservar en recipientes herméticos y almacenar protegido de la luz.
• Etiquetado: El etiquetado indica el contenido de d-alfa tocoferol, expresado en mg/g.
• Estándares de referencia USP 11
ER Alfa Tocoferol USP