selenometionina
C5H11NO2Se 196,11
(S)-2-Amino-4-ácido (metilselenil)butírico [1464-42-2].
DEFINICIÓN
La selenometionina contiene no menos de 97,0% y no más de 103,0% de selenometionina (C5H11NO2Se) y contiene no menos de 39,0% y no más de 41,0% de selenio (Se), calculado tal como está.
IDENTIFICACIÓN
• A. Absorción de infrarrojos<197K>
ENSAYO
• Procedimiento
Fase móvil: 6,8 g/L de fosfato monobásico de potasio en agua. Ajustar con ácido fosfórico a un pH de 2,75 ± 0,25.
Solución de idoneidad del sistema: 0,16 mg/mL de ER Selenometionina USP y 0,8 mg/mL de ER L-Metionina USP en fase móvil
Solución estándar: 0,16 mg/mL de ER Selenometionina USP en fase móvil
Solución muestra: 0,16 mg/mL de Selenometionina en Fase móvil con sonicación. Pasar a través de un filtro de membrana de 0,45 -μm de tamaño de poro.
sistema cromatográfico
(Consulte Cromatografía<621>, Idoneidad del sistema).
Modo: LC
Detector: UV 220 nm
Columna: 4,6-mm × 25-cm; empaquetadura L1 con extremo polar-tapa
Caudal: 1 ml/min
Tamaño de la inyección: 20 µL
Idoneidad del sistema
Ejemplo: solución de idoneidad del sistema
[Nota - Los tiempos de retención relativos para la metionina y la selenometionina son 0,8 y 1,0, respectivamente.]
Requisitos de idoneidad
Resolución: No menos de 3,0 entre metionina y selenometionina
Factor de cola: No más de 2,0 para el pico de selenometionina
Desviación estándar relativa: no más de 2,0 % para el pico de selenometionina
Análisis
Muestras: Solución estándar y Solución muestra
Calcule el porcentaje de selenometionina (C5H11NO2Se) en la porción de selenometionina tomada:
Resultado = (rU/rS) × (CS/CU) × 100
rU= respuesta máxima de la Solución muestra
rS= respuesta máxima de la Solución estándar
CS= concentración de ER Selenometionina USP en la Solución estándar (mg/mL)
CU= concentración de Selenometionina en la Solución muestra (mg/mL)
Criterios de aceptación: 97,0%-103,0% tal cual
IMPUREZAS
• Metales pesados, Método I<231>: no más de 20 ppm
• Límite de sodio
Solución madre estándar: 10 µg/mL de sodio a partir de cloruro de sodio, previamente secado a 105ºC durante 2 h
Soluciones estándar: 0,2, 0,5 y 1,0 µg/ml de sodio. Pipetear 2,0, 5,0 y 10,0 ml de Solución madre estándar en matraces volumétricos de 100 ml separados. A cada matraz agregar 2,0 ml de solución de cloruro de potasio (1 en 5) y 1,0 ml de ácido clorhídrico y diluir a volumen con agua.
Solución muestra: Transferir 100 mg de Selenometionina a un matraz aforado de 100 -mL, agregar 2,0 mL de solución de cloruro de potasio (1 en 5) y 1,0 mL de ácido clorhídrico y diluir a volumen con agua.
Condiciones instrumentales
(Ver Espectrofotometría y luz-Dispersión<851>.)
Modo: espectrofotometría de absorción atómica
Longitud de onda analítica: 589 nm
Lámpara: Sodio hueco-cátodo
Llama: aire-acetileno
Análisis
Muestras: Soluciones estándar y Solución muestra
Determine las absorbancias de las soluciones. Grafique las absorbancias de las Soluciones estándar versus sus concentraciones (μg/mL de sodio) y dibuje la línea recta que mejor se ajuste a los puntos trazados. A partir del gráfico así obtenido, determine la concentración de sodio, CNa (µg/mL), en la Solución muestra.
Calcule el porcentaje de sodio en la porción de selenometionina tomada:
Resultado = (CNa/CSA) × F × 100
CNa= concentración de sodio en la Solución muestra (μg/mL), determinada a partir de la línea de regresión
CSA= concentración de Selenometionina en la Solución muestra (mg/mL)
F= factor de conversión, 0,001 mg/μg
Criterios de aceptación: No más de 0,1%
• Pureza cromatográfica
Solución estándar A: Transferir 50 mg de ER Selenometionina USP a un matraz aforado de 10 -mL, agregar 2 ml de agua, calentar para disolver si es necesario y diluir a volumen con metanol.
Solución estándar B: Transferir 1,0 ml de Solución estándar A a un matraz aforado de 100 ml y diluir a volumen con metanol.
Solución muestra: Transferir 50 mg de Selenometionina a un matraz aforado de 10 -mL, agregar 2 mL de agua, calentar para disolver si es necesario y diluir a volumen con metanol.
sistema cromatográfico
(Consulte Cromatografía<621>, Idoneidad del sistema).
Modo: cariño
Absorbente: capa de 0,25 -mm de mezcla de gel de sílice cromatográfica
Volumen de aplicación: 10 µL
Disolvente de revelado: butanol, ácido acético glacial y agua (4:1:1)
Reactivo en aerosol: 2 mg/mL de ninhidrina en alcohol
Análisis
Muestras: Solución estándar A, Solución estándar B y Solución muestra
Proceda como se indica en Cromatografía<621>, Cromatografía en capa fina. Deje que las manchas se sequen y desarrolle el cromatograma en el solvente de desarrollo hasta que el frente del solvente se haya movido tres cuartos de la longitud de la placa. Retire la placa de la cámara de desarrollo, marque el frente del disolvente y deje que el disolvente se evapore. Localice las manchas en la placa rociando con reactivo en aerosol y secándolo a 110 durante 10 min.
Criterios de aceptación: No más de 1,0%. El valor de RF del punto principal de la Solución muestra corresponde al de la Solución estándar A; y ninguna mancha, aparte de la mancha principal de la Solución muestra, es más grande o más intensa que la mancha principal de la Solución estándar B.
PRUEBAS ESPECÍFICAS
• Rotación óptica, rotación específica<781S>
Solución de muestra: 10 mg/mL en ácido clorhídrico 1 N
Criterios de aceptación: +17,0 a +19,5
• Contenido de Selenio
[Precaución-El selenio es tóxico; manéjelo con cuidado.]
Solución madre estándar: Disolver 1 g de selenio metálico en un volumen mínimo de ácido nítrico. Evaporar hasta sequedad, agregar 2 mL de agua y evaporar hasta sequedad. Repetir la adición de agua y la evaporación hasta sequedad tres veces. Disolver el residuo en ácido clorhídrico 3 N, transferir a un matraz volumétrico de 1000 ml y diluir a volumen con ácido clorhídrico 3 N. Esta solución contiene 1000 µg/ml de selenio.
Soluciones estándar: 20, 50 y 100 µg/mL de selenio. Pipetear 2,0, 5,0 y 10,0 ml de Solución madre estándar en matraces volumétricos de 100 ml separados. Diluir a volumen el contenido de cada matraz con agua.
Solución muestra: 0,125 mg/mL de Selenometionina en agua
Condiciones instrumentales
(Ver Espectrofotometría y luz-Dispersión<851>.)
Modo: espectrofotometría de absorción atómica
Longitud de onda analítica: 196 nm
Lámpara: Selenio hueco-cátodo
Llama: Aire-acetileno
En blanco: agua
Análisis
Muestras: Soluciones estándar y Solución muestra
Determine las absorbancias de las soluciones. Grafique las absorbancias de las Soluciones estándar versus sus concentraciones (μg/mL de selenio) y dibuje la línea recta que mejor se ajuste a los puntos trazados. A partir del gráfico así obtenido, determine la concentración de selenio, CSe (µg/mL), en la solución muestra.
Calcule el porcentaje de selenio en la porción de selenometionina tomada:
Resultado = (CSe/CSA) × F × 100
CSe= concentración de selenio en la Solución muestra (µg/mL), determinada a partir de la línea de regresión
CSA= concentración de Selenometionina en la Solución muestra (mg/mL)
F= factor de conversión, 0,001 mg/μg
Criterios de aceptación: 39,0%-41,0% tal cual
REQUISITOS ADICIONALES
• Envasado y Almacenamiento: Conservar en recipientes bien cerrados.
• Estándares de referencia USP<11>
USP L-ER Metionina
ER Selenometionina USP