Dihidrocloruro de histamina (CAS: 56-92-8) EP9.0 VolumenⅡMétodo de prueba
DEFINICIÓN
El diclorhidrato de histamina contiene no menos del 98,5 por ciento y no más del equivalente al 101,0 por ciento de diclorhidrato de 2-(1H-imidazol-4-il)etano-1-amina, calculado con referencia a la sustancia seca.
PERSONAJES
Un polvo cristalino, blanco o casi blanco, o cristales incoloros, higroscópicos, muy soluble en agua, soluble en alcohol.
IDENTIFICACIÓN
Primera identificación: A, D.
Segunda identificación: B, C, D
A. Examinar mediante espectrofotometría de absorción infrarroja (2.2.24), comparándola con el espectro obtenido con diclorhidrato de histamina CRS. Examinar como discos preparados con 1 mg de sustancia.
B. Examinar los cromatogramas obtenidos en la prueba de histidina. La mancha principal en el cromatograma obtenido con la solución de prueba (b) es similar en posición, color y tamaño a la mancha principal en el cromatograma obtenido con la solución de referencia (a).
C. Disolver 0,1 g en 7 mL de agua R y agregar 3 mL de una solución de hidróxido de sodio R de 200 g/L. Disolver 50 mg de ácido sulfanílico R en una mezcla de 0,1 mL de ácido clorhídrico R y 10 mL de agua R y agregar 0,1 mL de solución de nitrito de sodio R. Agregar la segunda solución a la primera y mezclar. Se produce un color rojo.
D. Da la reacción (a) de cloruros (2.3.1).
PRUEBAS
Solución S. Disolver 0,5 g en agua libre de dióxido de carbono R preparada a partir de agua destilada R y diluir a 10 ml con el mismo disolvente.
Aspecto de la solución. La solución S es transparente (2.2.1) y no tiene un color más intenso que la solución de referencia Y7 (2.2.2, Método II).
pH (2.2.3). El pH de la solución S es de 2,85 a 3,60.
Histidina. Examinar mediante cromatografía en capa fina (2.2.27), usando una placa TLC de gel de sílice G R.
Solución de prueba (a). Disolver 0,5 g de la sustancia a examinar en agua R y diluir a 10 ml con el mismo disolvente.
Solución de prueba (b). Diluir 2 ml de solución problema (a) a 10 ml con agua R.
Solución de referencia (a). Disolver 0,1 g de diclorhidrato de histamina CRS en agua R y diluir a 10 ml con el mismo disolvente.
Solución de referencia (b). Disolver 50 mg de monoclorhidrato de histidina R en agua R y diluir a 100 ml con el mismo disolvente.
Solución de referencia (c). Mezcle 1 ml de solución de prueba (a) y 1 ml de solución de referencia (b).
Aplicar a la placa 1 μL de solución de prueba (a), 1 μL de solución de prueba (b), 1 μL de solución de referencia (a), 1 μL de solución de referencia (b) y 2 μL de solución de referencia (c). Desarrollar en un recorrido de 15 cm utilizando una mezcla de 5 volúmenes de amoniaco concentrado R, 20 volúmenes de agua R y 75 volúmenes de acetonitrilo R. Secar la placa en corriente de aire. Repetir el desarrollo en la misma dirección, secar la placa con corriente de aire y rociar con solución de ninhidrina R1. Calentar la placa a 110°C durante 10 min. Cualquier mancha correspondiente a histidina en el cromatograma obtenido con la solución problema (a) no es más intensa que la mancha en el cromatograma obtenido con la solución de referencia (b) (1%). La prueba no es válida a menos que el cromatograma obtenido con la solución de referencia (c) muestre 2 manchas claramente separadas.
Sulfatos (2.4.13). 3mL de solución S diluida a 15 mL con agua destilada R cumple con la prueba límite para sulfatos (0,1 por ciento).
Pérdida por desecación (2.2.32). No más del 0,5 por ciento, determinado en 0,20 g mediante secado en estufa a 105 °C.
Cenizas sulfatadas (2.4.14). No más del 0,1 por ciento, determinado sobre 0,5 g.
ENSAYO
Disolver 0,080 g en una mezcla de 5,0 mL de ácido clorhídrico 0,01 M y 50 mL de alcohol R. Realizar una titulación potenciométrica (2.2.20), utilizando hidróxido de sodio 0,1 M. Leer el volumen añadido entre el primer y tercer punto de inflexión.
1 ml de hidróxido de sodio 0,1 M equivale a 9,203 mg de C5H11Cl2N3.
ALMACENAMIENTO
Conservar en un recipiente hermético, protegido de la luz.