Clorhidrato de gemcitabina
C9H11F2N3O4·HCl 299,66
Citidina, 2′-desoxi-2′,2′-difluro-, monoclorhidrato.
2′-Desoxi-2′,2′-monoclorhidrato de difluorocitidina (β-isómero) [122111-03-9].
» El clorhidrato de gemcitabina contiene no menos del 97,5 por ciento ni más del 101,5 por ciento de C9H11F2N3O4·HCl, calculado sobre la base del estado actual.
[Precaución-El clorhidrato de gemcitabina es un potente agente citotóxico. Se debe tener mucho cuidado para evitar inhalar partículas y exponer la piel a ellas.]
Envasado y almacenamiento-Conservar en recipientes herméticos.
Etiquetado-Cuando esté destinado a usarse en la preparación de formas farmacéuticas inyectables, la etiqueta indica que es estéril o que debe someterse a un procesamiento adicional durante la preparación de formas farmacéuticas inyectables.
Estándares de referencia USP<11>-
ER Citosina USP
ER Endotoxina USP
ER Clorhidrato de Gemcitabina USP
Identificación-
R: Absorción de infrarrojos <197K>.
B: Cumple con los requisitos de las pruebas de Cloruro<191>.
Rotación específica<781S>: entre +43 y +50, a las 20.
Solución de prueba: 10 mg por ml.
pH<791>: entre 2,0 y 3,0, en una solución que contiene 10 mg por ml.
Residuo por ignición<281>: no más del 0,1%.
Metales pesados, Método I<231>: 0,001%.
Pureza cromatográfica-
Solución A- Proceda como se indica para la fase móvil en el ensayo.
Solución B-Preparar metanol filtrado y desgasificado.
Fase móvil-Use mezclas variables de Solución A y Solución B como se indica en Sistema cromatográfico. Haga ajustes, si es necesario (consulte Idoneidad del sistema en Cromatografía 621).
Solución de idoneidad del sistema-Proceder como se indica en el Ensayo.
Solución estándar-Disolver una cantidad pesada con precisión de ER Clorhidrato de Gemcitabina USP y ER Citosina USP en agua y diluir cuantitativamente, y gradualmente si es necesario, para obtener una solución que tenga una concentración conocida de aproximadamente 2 µg por ml de cada uno.
Solución de prueba-Transferir aproximadamente 50 mg de clorhidrato de gemcitabina, pesados ​​con precisión, a un matraz volumétrico de 25-mL, disolver y diluir con agua a volumen y mezclar.
Sistema cromatográfico (ver Cromatografía 621)-Proceda como se indica en Análisis. El cromatógrafo se programa de la siguiente manera.
Tiempo (minutos) Solución A (%) Solución B (%) Elución
0–8 97 3 isocrático
8–13 97®50 3®50 gradiente lineal
13–20 50 50 isocrático
20–25 50®97 50®3 re-equilibrio
Cromatografía la solución de idoneidad del sistema y registra las respuestas de los picos como se indica en el Procedimiento: los tiempos de retención relativos son aproximadamente 0,5 para el anómero de gemcitabina y 1,0 para la gemcitabina; la resolución, R, entre el anómero de gemcitabina y la gemcitabina no es inferior a 8,0; y el factor de cola para gemcitabina no es superior a 1,5. Cromatografía la solución estándar y registra las respuestas de los picos como se indica en el Procedimiento: los tiempos de retención relativos son aproximadamente 0,1 para citosina y 1,0 para gemcitabina; la desviación estándar relativa para inyecciones repetidas no es superior al 2,0%.
Procedimiento-Inyecte por separado un volumen (aproximadamente 20 µL) de la Solución estándar y la Solución de prueba en el cromatógrafo, registre el cromatograma y mida todas las respuestas de los picos. Calcule el porcentaje de citosina en la porción de gemcitabina tomada mediante la fórmula:
2,5(Cc/W)(rt/rs)
donde Cc es la concentración de ER Citosina USP en la Solución estándar, en µg por ml; W es el peso, en mg, de gemcitabina tomada; rt es la respuesta máxima de citosina en la solución de prueba; y rs es la respuesta de citosina en la Solución estándar: no se encuentra más del 0,1% de citosina. Calcule el porcentaje de cada impureza distinta de la citosina en la porción de gemcitabina tomada mediante la fórmula:
2,5(Cs/W)(ri/rs)
donde Cs es la concentración de ER Clorhidrato de Gemcitabina USP en la Solución estándar, en µg por ml; W es el peso, en mg, de gemcitabina tomada; ri es la respuesta máxima para cada impureza en la solución de prueba; y rs es la respuesta debida a la gemcitabina en la Solución estándar: no se encuentra más del 0,1% del anómero de gemcitabina o cualquier otra impureza individual; y la suma de todas las impurezas no supera el 0,2%. Excluir de la suma de todas las impurezas cualquier pico que esté por debajo del límite de cuantificación (0,02%).
Otros requisitos-Cuando la etiqueta indica que el clorhidrato de gemcitabina es estéril, cumple con los requisitos de endotoxinas bacterianas y esterilidad de gemcitabina inyectable. Cuando la etiqueta indica que el clorhidrato de gemcitabina debe someterse a un procesamiento adicional durante la preparación de formas farmacéuticas inyectables, cumple con los requisitos para endotoxinas bacterianas bajo Gemcitabina inyectable.
Ensayo-
Fase móvil-Preparar una solución filtrada y desgasificada que contenga 13,8 g de fosfato de sodio monobásico y 2,5 ml de ácido fosfórico en 1000 ml de agua. [nota-El pH de esta solución está entre 2,4 y 2,6. ]
Solución de idoneidad del sistema - Transfiera aproximadamente 10 mg de clorhidrato de gemcitabina a un vial pequeño, agregue 4 ml de una solución que contenga 168 mg de hidróxido de potasio por ml de metanol, tape herméticamente y someta a ultrasonidos. Calentar a 55ºC durante 6 a 16 horas, dejar enfriar y transferir el contenido a un matraz volumétrico de 100 ml con lavados sucesivos de ácido fosfórico al 1% (v/v). Diluir a volumen con ácido fosfórico al 1% y mezclar. [nota-Esta solución contiene aproximadamente 0,02 mg por ml de anómero α-de gemcitabina.]
Preparación estándar-Disolver una cantidad pesada con precisión de ER Clorhidrato de Gemcitabina USP en agua y diluir cuantitativamente, y gradualmente si es necesario, con agua para obtener una solución que tenga una concentración conocida de aproximadamente 0,1 mg por ml.
Preparación del ensayo - Transfiera aproximadamente 20 mg de clorhidrato de gemcitabina, pesados ​​con precisión, a un matraz volumétrico de 200 - ml, disuélvalos y diluya a volumen con agua y mezcle.
Sistema cromatográfico (consulte Cromatografía<621>)-El cromatógrafo líquido está equipado con un detector de 275 nm y una columna de 4,6 mm × 25 cm que contiene un relleno L7 de 5 µm. El caudal es de aproximadamente 1,2 ml por minuto. Cromatografía la solución de idoneidad del sistema y registra las respuestas de los picos como se indica en el Procedimiento: la resolución, R, entre el anómero de gemcitabina y la gemcitabina no es inferior a 8,0; y el factor de cola determinado a partir de gemcitabina no es superior a 1,5. Cromatografía la preparación estándar y registra las respuestas máximas como se indica en el Procedimiento: la desviación estándar relativa para inyecciones repetidas no es superior al 1,0 %.
Procedimiento-Inyecte por separado volúmenes iguales (aproximadamente 20 µL) de la preparación estándar y la preparación de ensayo en el cromatógrafo, registre los cromatogramas y mida las respuestas de los picos principales. Calcular la cantidad, en mg, de C9H11F2N3O4·HCl en la porción de Clorhidrato de Gemcitabina tomada mediante la fórmula:
200C(ru/rS)
donde C es la concentración, en mg por ml, de ER Clorhidrato de Gemcitabina USP en la Preparación estándar; y rU y rS son las respuestas máximas obtenidas de la preparación de ensayo y la preparación estándar, respectivamente.