Bacitracinas, complejo de zinc.
Complejo de bacitracinas y zinc [1405-89-6].
» Bacitracina Zinc es el complejo de zinc de la bacitracina, que consiste en una mezcla de polipéptidos antimicrobianos, siendo los componentes principales las bacitracinas A, B1, B2 y B3. Tiene una potencia de no menos de 65 unidades de bacitracina por mg, calculada en base seca. Contiene no menos del 4,0 por ciento ni más del 6,0 por ciento de zinc (Zn), calculado sobre la base seca.
Embalaje y almacenamiento- Consérvelo en recipientes herméticos y guárdelo en un lugar fresco.
Etiquetado-Etiquételo para indicar que debe usarse únicamente en la fabricación de medicamentos no parenterales. Cuando esté empaquetado para compuestos recetados, etiquételo para indicar que no es estéril y que no se puede garantizar la potencia por más de 60 días después de abrirlo, y para indicar la cantidad de unidades de bacitracina por miligramo. Cuando esté destinado a usarse en la preparación de formas de dosificación estériles, la etiqueta indica que es estéril o que debe someterse a un procesamiento adicional durante la preparación de formas de dosificación estériles.
Estándares de referencia USP<11>-
ER Bacitracina Zinc USP
Identificación-
A: Prueba de identificación cromatográfica en capa fina<201BNP>: cumple con los requisitos.
B: Cumple con los requisitos del procedimiento de cromatografía líquida en la prueba de Composición.
Esterilidad<71>-Cuando la etiqueta indica que es estéril, cumple con los requisitos cuando se prueba según lo indicado para la filtración por membrana en la Prueba de esterilidad del producto a examinar, excepto para usar el líquido A a cada litro del cual se le han agregado 20 g de edetato disódico.
pH<791>: entre 6,0 y 7,5, en una solución (saturada) que contiene aproximadamente 100 mg por ml.
Pérdida por desecación<731>-Secar unos 100 mg en un frasco con tapón capilar al vacío a 60ºC durante 3 horas: no pierde más del 5,0% de su peso.
Contenido de zinc- [nota-Las preparaciones estándar y la preparación de prueba pueden diluirse cuantitativamente con ácido clorhídrico 0,001 N, si es necesario, para obtener soluciones de concentraciones adecuadas, adaptables al rango lineal o de trabajo del instrumento. ]
Preparaciones estándar-Transferir 3,11 g de óxido de zinc, pesados con precisión, a un matraz volumétrico de 250-mL, agregar 80 mL de ácido clorhídrico 1 N, calentar hasta disolver, enfriar, diluir a volumen con agua y mezclar. Esta solución contiene 10 mg de zinc por ml. Diluir aún más esta solución con ácido clorhídrico 0,001 N para obtener preparaciones estándar que contengan 0,5, 1,5 y 2,5 µg de zinc por ml, respectivamente.
Preparación de la prueba - Transfiera aproximadamente 200 mg de bacitracina zinc, pesados ​​con precisión, a un matraz volumétrico de 100 - ml. Disolver en ácido clorhídrico 0,01 N, diluir a volumen con el mismo disolvente y mezclar. Pipetear 2 ml de esta solución en un matraz volumétrico de 200 ml, diluir a volumen con ácido clorhídrico 0,001 N y mezclar.
Procedimiento - Determine concomitantemente las absorbancias de las preparaciones estándar y la preparación de prueba en la línea de resonancia de zinc de 213,8 ​​nm, con un espectrofotómetro de absorción atómica adecuado (consulte Espectrofotometría y dispersión de luz <851>), equipado con una lámpara de cátodo hueco de zinc y una llama de aire-acetileno, utilizando ácido clorhídrico 0,001 N como blanco. Grafique las absorbancias de las Preparaciones estándar versus la concentración, en µg por ml, de zinc, y dibuje la línea recta que mejor se ajuste a los tres puntos trazados. A partir del gráfico así obtenido, determine la concentración, en µg por ml, de zinc en la preparación muestra. Calcule el contenido de zinc, en porcentaje, en la porción de Bacitracina Zinc tomada mediante la fórmula:
1000C/W
en la que C es la concentración, en µg por ml, de zinc en la preparación prueba; y W es el peso, en mg, de la porción de Bacitracina Zinc tomada.
Composición-
Búfer- Disolver 34,8 g de fosfato potásico dibásico en 1 litro de agua. Ajustar con 27,2 g de fosfato potásico monobásico, disueltos en 1 L de agua, a un pH de 6,0.
Fase móvil-Preparar una mezcla de metanol, agua, tampón y acetonitrilo (26:15:5:2). Mezclar bien y desgasificar.
Diluyente-Disolver 40 g de edetato disódico en 1 L de agua. Ajustar con hidróxido de sodio diluido a un pH de 7,0.
Solución de idoneidad del sistema-Disolver una cantidad pesada con precisión de ER Bacitracina Zinc USP en Diluyente para obtener una solución con una concentración nominal de aproximadamente 2,0 mg por ml.
Solución umbral de informe-Diluir cuantitativamente, con agua, un volumen adecuado de Solución de idoneidad del sistema para obtener una solución con una concentración conocida de 0,01 mg por ml.
Solución de identificación de picos-Disolver una cantidad pesada de ER Bacitracina Zinc USP en un volumen adecuado de Diluyente para obtener una solución con una concentración nominal de aproximadamente 2,0 mg por ml. Calentar al baño maría hirviendo durante 30 minutos. Dejar enfriar a temperatura ambiente.
Solución de prueba-Disolver una cantidad pesada con precisión de Bacitracina Zinc en diluyente para obtener una solución con una concentración nominal de aproximadamente 2,0 mg por ml.
Sistema cromatográfico (ver Cromatografía<621>)-El cromatógrafo líquido está equipado con un detector de absorbancia y un extremo-tapado 4.6- Columna de × 250-mm que contiene relleno L1 de 5-μm. El caudal es de 1,0 ml por minuto. Establezca la longitud de onda del detector a 300 nm. Inyecte aproximadamente 100 ml de la solución de identificación de picos e identifique la ubicación de la bacitracina F, que es una impureza conocida, utilizando el tiempo de retención relativo que se muestra en la Tabla 1.
Tabla 1
Nombre del componente Tiempo de retención relativo (aproximado)
Bacitracina C1 0,5
Bacitracina C2 0,6
Bacitracina C3 0,6
Bacitracina B1 0,7
Bacitracina B2 0,7
Bacitracina B3 0,8
Bacitracina A 1.0
Bacitracina F 2.4
Cambie la longitud de onda del detector y configúrelo en 254 nm. Cromatografíe la solución de idoneidad del sistema y registre las respuestas de los picos como se indica en el Procedimiento: identifique los picos de los componentes más activos de la bacitracina (bacitracinas A, B1, B2 y B3), los péptidos de elución temprana (aquellos que eluyen antes del pico debido a la bacitracina B1) y la impureza, bacitracina F, utilizando los valores de tiempo de retención relativo indicados en la Tabla 1. Calcule la relación pico/valle usando la fórmula:
caballos de fuerza / alto voltaje
en el que Hp es la altura por encima de la línea base del pico debido a la bacitracina B1; y HV es la altura por encima de la línea base del punto más bajo de la curva que separa el pico de bacitracina B1 del pico debido a la bacitracina B2. La relación pico/valle no es inferior a 1,2.
Procedimiento-Inyecte por separado volúmenes iguales (100 µL) de diluyente, solución de prueba y solución de umbral de informe. Registre los cromatogramas durante aproximadamente tres veces el tiempo de retención de la bacitracina A. Identifique los picos utilizando los tiempos de retención relativos que se muestran en la Tabla 1. Mida las áreas de los picos de todos los picos en la solución de prueba. [nota-Ignore cualquier pico en la solución de prueba que tenga un área menor que el área del pico de bacitracina A en la solución umbral de informe; ignore cualquier pico observado en el diluyente.]
nota-El área total en los siguientes cálculos se define como el área de todos los picos excepto el umbral de informe.
contenido de bacitracina a-Calcule el porcentaje de bacitracina A usando la fórmula:
(rA/área total) × 100
en el que rA es la respuesta del área de la bacitracina A. El contenido de bacitracina A no es inferior al 40,0 % del área total.
contenido de bacitracina activa-Calcule el porcentaje de bacitracina activa (bacitracina A, B1, B2 y B3) usando la fórmula:
(rA + rB1 + rB2 + rB3 / Área total)×100
en el que rA, rB1, rB2 y rB3 son las respuestas de área de la bacitracina A, B1, B2 y B3, respectivamente. La suma de bacitracina A, B1, B2 y B3 no es inferior al 70,0% del área total.
límite de péptidos de elución temprana - Calcule el porcentaje de todos los picos que eluyen antes del pico debido a la bacitracina B1 usando la fórmula:
(rPreB1 / Área total) ×100
en el que rPreB1 es la suma de las respuestas de todos los picos que eluyen antes del pico de bacitracina B1. El límite de péptidos de elución temprana (aquellos que eluyen antes del pico debido a la bacitracina B1) no es superior al 20,0%.
límite de bacitracina f- Calcule el porcentaje de bacitracina F usando la fórmula:
100 × (rF/rA)
en la que rF es la respuesta de la bacitracina F de la solución de prueba; y rA es la respuesta de la bacitracina A de la solución de prueba. El límite de bacitracina F, una impureza conocida, no supera el 6,0%.
Análisis-Continúe con Bacitracina Zinc como se indica en Antibióticos-Ensayos microbianos 81.