Alendronato de sodio
C4H12NNaO7P2·3H2O 325,12
Ácido fosfónico, (4-amino-1-hidroxibutiliden)bis-, sal monosódica, trihidrato.
Trihidrógeno (4-amino-1-hidroxibutilideno)difosfonato de sodio, trihidrato [121268-17-5].
» El alendronato sódico contiene no menos del 98,0 por ciento ni más del 102,0 por ciento de C4H12NNaO7P2, calculado sobre la base seca.
Embalaje y almacenamiento- Conservar en recipientes bien cerrados. Conservar a temperatura ambiente.
Estándares de referencia USP<11>-
ER Alendronato Sódico USP
Identificación-
R: Absorción de infrarrojos <197 M>.
B: Cumple con los requisitos de la prueba de llama para Sodio<191>.
Pérdida por secado<731>- Secarlo a una presión no superior a 5 mm de mercurio a 140ºC hasta peso constante: pierde no menos del 16,1% ni más del 17,1% de su peso.
Metales pesados, Método III<231>: 0,001%.
Pureza cromatográfica-
Solución de borato y diluyente- Prepárese como se indica en el Ensayo.
Solución tampón- Transferir 5,88 g de citrato de sodio dihidrato y 2,84 g de fosfato de sodio dibásico anhidro a un matraz aforado de 2 l, diluir a volumen con agua y mezclar. Ajustar con ácido fosfórico a un pH de 8 y pasar la solución a través de un filtro que tenga una porosidad de 0,5 µm o más fina.
9-Solución de cloroformiato de fluorenilmetilo- Prepare una solución en acetonitrilo que contenga aproximadamente 4 mg de cloroformiato de 9-fluorenilmetilo por ml. Prepare esta solución fresca justo antes de usarla.
Solución A- Preparar una mezcla filtrada y desgasificada de solución tampón y acetonitrilo (17:3).
Solución B- Preparar una mezcla filtrada y desgasificada de acetonitrilo y solución tampón (7:3).
Fase móvil- Utilice mezclas variables de Solución A y Solución B según las indicaciones del sistema cromatográfico. Realice ajustes si es necesario (consulte Idoneidad del sistema en Cromatografía<621>).
Solución madre estándar- Prepare una solución de ER Alendronato Sódico USP en Diluyente que tenga una concentración conocida de aproximadamente 0,6 mg por ml.
Solución estándar- Transfiera 5,0 ml de la solución madre estándar a un tubo de centrífuga con tapa de rosca de polipropileno de 50 ml que contenga 5 ml de solución de borato. Agregue 5 ml de acetonitrilo y 5 ml de solución de cloroformiato de 9-fluorenilmetilo y agite durante 45 segundos. Dejar reposar a temperatura ambiente durante 30 minutos. Agregue 20 ml de cloruro de metileno y agite vigorosamente durante 1 minuto. Centrifugar durante 5 a 10 minutos y utilizar una porción de la capa acuosa superior transparente.
Solución estándar diluida- Diluir una porción de la Solución madre estándar con Diluyente para obtener una solución que tenga una concentración conocida de aproximadamente 0,6 µg por ml. Usando 5 ml de esta solución, proceda como se indica para la Solución estándar, comenzando con “a un tubo de centrífuga con tapa de rosca de polipropileno de 50 ml”.
Blanco reactivo- Usando una porción de 5,0 ml de Diluyente, proceda como se indica para la Solución estándar, comenzando con "a un tubo de centrífuga con tapa de rosca de polipropileno de 50 ml".
Solución de prueba- Transfiera aproximadamente 30 mg de alendronato sódico, pesados ​​con precisión, a un matraz volumétrico de 50 ml, disuélvalo y diluya a volumen con diluyente y mezcle. Usando un volumen de 5,0 ml de esta solución, proceda como se indica para la Solución estándar, comenzando con “a un tubo de centrífuga con tapa de rosca de polipropileno de 50 ml”.
Sistema cromatográfico (ver Cromatografía<621>)- El cromatógrafo líquido está equipado con un detector de 266 nm y una columna de 4,1 mm × 25 cm que contiene el relleno L21. El caudal es de aproximadamente 1,8 ml por minuto. La temperatura de la columna se mantiene a aproximadamente 45ºC. El cromatógrafo se programa como sigue.
Tiempo (minutos) Solución A (%) Solución B (%) Elución
0 100 0 equilibrio
0-15 100→50 0→50 gradiente lineal
15-25 50→0 50→100 gradiente lineal
25-27 0→100 100→0 gradiente lineal
27-32 100 0 isocrático
Cromatografía la Solución estándar y la Solución estándar diluida y registra las respuestas de los picos como se indica en el Procedimiento: el factor de cola para el pico principal en el cromatograma de la Solución estándar no es superior a 2,0; y el pico en ese lugar en el cromatograma de la solución estándar diluida es detectable con una relación señal/ruido no inferior a 3.
Procedimiento- Inyecte por separado volúmenes iguales (aproximadamente 20 µL) de la solución de prueba y el blanco de reactivo en el cromatógrafo, registre los cromatogramas y mida las respuestas de todos los picos. Ignore cualquier pico correspondiente a los obtenidos del blanco de reactivo. Calcular el porcentaje de cada impureza en la porción de Alendronato Sódico tomada mediante la fórmula:
100(ri/rs)
en el que ri es el área de cada pico de impureza y rs es la suma de todos los picos de impureza y el pico principal: no se encuentra más del 0,1% de cualquier impureza individual y no se encuentra más del 0,5% del total de impurezas.
Ensayo-
Solución tampón- Transferir 14,7 g de citrato de sodio dihidrato y 7,05 g de fosfato de sodio dibásico anhidro a un matraz aforado de 1 -L, diluir a volumen con agua, mezclar y ajustar con ácido fosfórico a un pH de 8.
Diluyente- Disolver 29,4 g de citrato de sodio dihidrato en agua en un matraz aforado de 1 l, diluir a volumen con agua y mezclar.
Solución de borato- Disolver 19,1 g de borato de sodio en agua en un matraz aforado de 1 l, diluir a volumen con agua y mezclar.
9-Solución de cloroformiato de fluorenilmetilo- Prepare una solución en acetonitrilo que contenga aproximadamente 0,5 mg de cloroformiato de 9-fluorenilmetilo por ml. Prepare esta solución fresca justo antes de usarla.
Fase móvil- Preparar una mezcla filtrada y desgasificada de solución tampón, acetonitrilo y metanol (70:25:5). Realice ajustes si es necesario (consulte Idoneidad del sistema en Cromatografía<621>).
Preparación de caldo estándar- Prepare una solución de ER Alendronato Sódico USP en Diluyente que tenga una concentración conocida de aproximadamente 0,1 mg por ml. Calcule la concentración, CS, de alendronato de sodio anhidro en esta solución.
Preparación estándar- Transfiera 5,0 ml de la preparación madre estándar a un tubo de centrífuga con tapa de rosca de polipropileno de 50 ml que contenga 5 ml de solución de borato. Agregue 5 ml de solución de cloroformiato de 9-fluorenilmetilo y agite durante 30 segundos. Dejar reposar a temperatura ambiente durante 25 minutos. Agregue 25 ml de cloruro de metileno y agite vigorosamente durante 1 minuto. Centrifugar durante 5 a 10 minutos. Utilice una porción de la capa acuosa superior transparente.
Blanco reactivo- Usando 5,0 ml de diluyente, proceda como se indica para la preparación estándar, comenzando con “a un tubo de centrífuga con tapa de rosca de polipropileno de 50 ml”.
Preparación del stock de ensayo- Transferir aproximadamente 25 mg de alendronato sódico, pesados ​​con precisión, a un matraz volumétrico de 250 ml, disolver y diluir a volumen con diluyente y mezclar.
Preparación del ensayo- Usando 5,0 ml de la preparación madre del ensayo, proceda como se indica para la preparación estándar, comenzando con “a un tubo de centrífuga con tapa de rosca de polipropileno de 50 ml”.
Sistema cromatográfico (ver Cromatografía<621>)- El cromatógrafo líquido está equipado con un detector de 266 nm y una columna de 4,1 mm × 25 cm que contiene el relleno L21. El caudal es de aproximadamente 1,2 ml por minuto. La temperatura de la columna se mantiene a aproximadamente 35ºC. Cromatografía la preparación estándar y registra las respuestas de los picos como se indica en el Procedimiento: la eficiencia de la columna no es inferior a 1500 platos teóricos, el factor de cola no es superior a 1,5 y la desviación estándar relativa para inyecciones repetidas no es superior al 2,0%.
Procedimiento: inyecte por separado volúmenes iguales (aproximadamente 10 µL) de la preparación estándar, la preparación de ensayo y el blanco de reactivo en el cromatógrafo, registre los cromatogramas y mida las respuestas de los picos principales. Calcule la cantidad, en mg, de C4H12NNaO7P2 en la porción de Alendronato de Sodio tomada mediante la fórmula:
DCS (RU/RS)
en el que D es el factor de dilución para la preparación madre del ensayo; CS es como se define en la preparación de stock estándar; y rU y rS son las respuestas del área de pico para el ácido alendrónico obtenidas de la Preparación de ensayo y la Preparación estándar, respectivamente.